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| THÉORIE Principe de la séparation des protéines par électrophorèse L’électrophorèse des protéines en gel de polyacrylamide en présence de SDS (SDS - PAGE) Les conditions de l’électrophorèse. Les paramètres électriques Révélation et identification des protéines (différentes méthodes de coloration y compris la coloration à l’argent) Principe du transfert des protéines pour le “Western Blot” (WB) Méthode de transfert des protéines sur membranes après SDS - PAGE Méthodes de révélation et d’identification des protéines d’intérêt Séparation des protéines par électrophorèse bidimensionnelle en gel de polyacrylamide TRAVAUX PRATIQUES Découverte de la méthodologie et des appareils. Démonstration de la procédure Préparation des tampons, des solutions et des réactifs Préparation et polymérisation des gels de polyacrylamide Dépôt des échantillons Début de l’électrophorèse Décoloration des gels après coloration au bleu de Coomassie Coloration des protéines à l’argent Révélation des protéines séparées par SDS - PAGE et transférées sur membrane la veille |
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