Ingénieurs, Techniciens Supérieurs, Pharmaciens

Donner les notions de base de la méthode QPCR
Les principes et les applications

. Bases moléculaires de la PCR
. Limites de la PCR en point final et réponse de la PCR en temps réel :
détermination de la phase “quantitative” de la PCR
. Gamme d’étalonnage en nombres de copies :
une nécessité
. PCR en temps réel :
quantification du nombre de copies d’ADN avant amplification
. Détection des produits d’amplification :
sensibilité et spécificité
. Etapes essentielles dans la mise au point d’une quantification d’ADN par PCR en temps réel
. Familles de thermocycleurs :
avantages et inconvénients
. Plateforme de RT et qPCR :
principe de “marche en avant” et “Bonnes Pratiques de Laboratoire”
. Les recommandations “MIQE” :
Minimum Information for publication of Quantitative realtime PCR Experiments
. Applications de la PCR en temps réel à
La quantification de transcrits dans les analyses d’expression relative de gènes d’intérêt : RT-qPCR quantitative ou relative ?
Atouts des étalons externes non compétitifs
A l’agro-alimentaire
A la virologie
. PCR multiplex : avantages et inconvénients
. Discussions de cas pratiques partagés par les participants